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实验外包——吉姆萨染色实验

发布时间:2025-12-31
浏览次数:439
作者:东极药物

吉姆萨染液由天青,伊红组成。染色原理和结果与瑞特染色法基本相同。但本法对细胞核和寄生虫着色较好,结构显示更清晰,而胞质和中性颗粒则着色较差。基本方案实验材料原位杂交玻片试剂、试剂盒吉姆萨染色液磷酸钠缓···


吉姆萨染液由天青,伊红组成。染色原理和结果与瑞特染色法基本相同。但本法对细胞核和寄生虫着色较好,结构显示更清晰,而胞质和中性颗粒则着色较差。

基本方案

实验材料 

原位杂交玻片

试剂、试剂盒

吉姆萨染色液磷酸钠缓冲液乙醇二甲苯

仪器、耗材

染色盘培养箱滤纸

实验步骤

1.  将显影的玻片置于玻片架上,浸入盛有水的染色盘中。 

(1)1个盘:pH6.8 10 mmol/l 磷酸钠缓冲液,所配的25倍稀释的吉姆萨染液。 

(2)3个盘:水。 

(3)脱水系列溶液: 

①3个盘:分别盛50%、70%和95%乙醇。 

②2个盘:盛有100%乙醇。 

③3个盘:盛有二甲苯。

3.  在25倍稀释的吉姆萨染液中染玻片20 s(依染色时间决定染色的强弱),将玻片在水中浸泡3次,每次2 min。 

4.  连续用乙醇脱水系列溶液处理,每盘中浸泡2 min,将玻片移至二甲苯盘中,毎次浸泡2 min,共3次。

5.  在通风橱中,按如下操作压片固定:用一平头镊(拿在左手),从二甲苯中取出一块玻片,夹住磨面端置水平。加4滴Permount 的于另一端(切片所处位置),左手拿一干净的盖玻片,很缓慢地放在载玻片上(在加压片固定介质和盖玻片前,勿使玻片变干,因微小气泡会造成人为假象)。

6.  用3MM 滤纸,沿盖玻片边缘,小心吸去多余固片介质/二甲苯,并擦拭载玻片背面(勿擦拭盖玻片)。 

7.  将玻片平放于一硬纸盒盘上,置42℃温孵箱2天使之凝固。

8.  以剃须刀片小心刮去载玻片背面残留胶乳,染料及固片介质。用镜头纸或普通棉纸擦去尘埃。放入玻片盒,必要时,载玻片上再注明标签。

9.  显微镜观察玻片,观察时可依信号强弱,调节光亮。

注意事项

1.  勿将玻片直立存放于玻片中,因此时固片介质尚未凝结。


文章出自:验外   想了解更多请关注:http://www.dj-cro.com/

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